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基于微孔濾膜截留的生物樣品處理原理

導(dǎo)讀:是利用濾膜的選擇性實(shí)現(xiàn)溶液中不同物質(zhì)的分離、純化和濃縮的分離技術(shù)。根據(jù)濾膜孔徑可以分為微濾、超濾、納濾和反滲透,其分離范圍;根據(jù)材料又可分為無(wú)機(jī)膜和有機(jī)膜,無(wú)機(jī)膜


返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2020-03-13 10:09【
采用微濾技術(shù)在全密閉流路中實(shí)現(xiàn)空間培養(yǎng)或搭載的動(dòng)物細(xì)胞與培養(yǎng)基的分離,再經(jīng)過(guò)等滲氯化鈉溶液的清洗,采用RIPA裂解液使細(xì)胞膜破碎,釋放細(xì)胞內(nèi)容物,并使用FITC對(duì)細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和氨基酸等物質(zhì)進(jìn)行熒光衍生化,為熒光檢測(cè)裝置提供樣品。

利用微濾技術(shù)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分離膜分離
是利用濾膜的選擇性實(shí)現(xiàn)溶液中不同物質(zhì)的分離、純化和濃縮的分離技術(shù)。根據(jù)濾膜孔徑可以分為微濾、超濾、納濾和反滲透,其分離范圍;根據(jù)材料又可分為無(wú)機(jī)膜和有機(jī)膜,無(wú)機(jī)膜主要是陶瓷和金屬膜,過(guò)濾精度低,選擇性差,而有機(jī)膜是由高分子材料制成,如醋酸纖維素膜、
聚醚砜膜、聚氟聚合物膜等。微濾又稱微孔過(guò)濾,基本原理是篩孔分離作用,當(dāng)膜表面存在一定壓力差的時(shí)候,微濾膜只允許比膜孔徑小的分子通過(guò),而將大于孔徑的病毒、微生物及顆粒等物質(zhì)截留,其截留特性是以膜孔徑表征,通常其孔徑范圍在幾十納米到幾微米之間。

本實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞直徑一般在10μm以上,因此本文選用5μm孔徑的
微孔濾膜,可以截留培養(yǎng)基中的懸浮細(xì)胞而透過(guò)培養(yǎng)液,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)二者的分離。這一過(guò)程是一種純粹的物理過(guò)程,并未發(fā)生相變和化學(xué)變化,可以最大限度的保證樣品不受污染。實(shí)現(xiàn)這一過(guò)程所需硬件體積小,結(jié)構(gòu)緊湊,而且過(guò)程簡(jiǎn)單易操作,僅僅需要在膜表面施加一定的壓力差即可,可以方便的集成在密閉的流路中。

基于微孔濾膜的懸浮細(xì)胞截留與清洗效果
微孔過(guò)濾的原理是利用多孔材料的攔截能力,主要通過(guò)物理篩分的方式截留溶液中一定大小的顆粒,膜的物理結(jié)構(gòu)起決定作用。U251細(xì)胞懸浮后直徑在10μm以上,本文選擇了孔徑為5μm的微孔濾膜截留細(xì)胞懸液中的細(xì)胞。



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