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天津津騰

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津騰微孔濾膜在紅細(xì)胞生成素α的應(yīng)用！

導(dǎo)讀:生物膜干涉技術(shù)是新興的生物傳感手段之一，其檢測原理是光通過傳感芯片的生物膜層后發(fā)生透射與反射，反射光的頻率與生物膜層厚度有關(guān)。一些頻率的反射光與入射光發(fā)生相長干涉


返回列表 來源：未知 發(fā)布日期：2020-05-15 09:49【大 中 小】
生物膜干涉技術(shù)是新興的生物傳感手段之一，其檢測原理是光通過傳感芯片的生物膜層后發(fā)生透射與反射，反射光的頻率與生物膜層厚度有關(guān)。一些頻率的反射光與入射光發(fā)生相長干涉，而另一些發(fā)生相消干涉，從而形成干涉光譜。天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到本研究建立了以適配體39nt為分析傳感元件的BLI新方法，將生物素化的適配體固定于鏈霉親和素(SA)傳感芯片上，考察了適配體的親和性發(fā)揮，特別是研究了適配體元件的取向、固定濃度等關(guān)鍵因素的影響，成功構(gòu)建了基于麥胚凝集素(WGA)夾心法的信號放大策略，實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜基質(zhì)人血漿的中EPO-α的靈敏、準(zhǔn)確檢測。

1儀器與試劑
BLITZ單樣本分子相互作用分析儀(美國ForteBio公司)，SA傳感芯片(ForteBio公司)。SA傳感芯片為即插即用式，裝載固定于分析儀機(jī)身上方正中;分析儀機(jī)身下部是不同尺寸的樣品池，使用時按需手動平移對準(zhǔn)至芯片正下方。所有核酸適配體序列的變性、復(fù)性步驟于PCR儀(德國Eppendorf公司)上完成，均為95℃變性5min，然后以1℃/min緩慢降至室溫。所有寡核苷酸序列均為上海生工生物技術(shù)公司合成，所用試劑至少為分析純。

實(shí)驗(yàn)前，所有的緩沖液經(jīng)0.22μm微孔水相濾膜(天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)過濾并超聲脫氣。實(shí)驗(yàn)用水為Milli-QA10超純水儀(美國Millipore公司)制備的超純水(18.2MΩ·cm)。所有溶液使用之前，均經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理。


天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到本文建立了基于適配體的BLI方法，實(shí)現(xiàn)了EPO-α的靈敏檢測。優(yōu)化了SA傳感芯片表面固定的生物素化適配體元件的取向和濃度，利用WGA和適配體39nt作用于EPO-α的不同位點(diǎn)的特性，成功構(gòu)建了BLI信號放大傳感體系，用于EPO-α的檢測，檢出限為5nmol/L。此BLI傳感體系的開發(fā)，為適配體與靶分子間相互作用研究提供了參考。借助于其它更高質(zhì)量的信號放大分子(如EPO抗體)、納米器件(如WGA或EPO抗體標(biāo)記的金納米粒子等)或酶催化方法體系，可望實(shí)現(xiàn)更為靈敏的檢測，拓展本體系的實(shí)用價值。



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