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津騰

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津騰微孔濾膜在白玉蝸牛糖胺聚糖分離中的應(yīng)用

導(dǎo)讀:天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到白玉蝸牛屬柄眼目瑪瑙螺科，是非洲大蝸牛的白化亞種，是我國(guó)已大量人工養(yǎng)殖的陸生貝殼類食材，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和廣泛的醫(yī)藥保健價(jià)值.天津津


返回列表 來(lái)源：未知 發(fā)布日期：2020-06-16 09:38【大 中 小】
天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到白玉蝸牛屬柄眼目瑪瑙螺科，是非洲大蝸牛的白化亞種，是我國(guó)已大量人工養(yǎng)殖的陸生貝殼類食材，具有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和廣泛的醫(yī)藥保健價(jià)值.天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到本文以白玉蝸牛肉為原料，對(duì)其所含的糖胺聚糖(AFG)進(jìn)行提取純化，采用具有糖苷鍵選擇性的β-消除解聚法對(duì)AFG進(jìn)行解聚，分析AFG單糖組成和硫酸羧酸摩爾比，結(jié)合AFG及dAFG的理化性質(zhì)及波譜分析法解析其基本化學(xué)結(jié)構(gòu)，為闡明其構(gòu)效關(guān)系及藥理機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

1.AFG和dAFG的理化性質(zhì)分析
1.1紫外-可見(jiàn)分光光度法(UV-Vis)
分別精密稱取AFG和dAFG1mg，配制成1mg/mL的水溶液，在190～400nm波長(zhǎng)范圍進(jìn)行掃描.

1.2高效凝膠色譜法(HPGPC)
天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司了解到本文分別精密稱取AFG和dAFG1mg，配制成1mg/mL的水溶液，經(jīng)0.45μm天津津騰微孔濾膜過(guò)濾后，進(jìn)行HPGPC分析，記錄色譜圖.色譜條件:ShodexOHpakSB-804HQ色譜柱;柱溫，35℃;流動(dòng)相為0.1mol/L氯化鈉溶液;流速為0.5mL/min;進(jìn)樣量為50μL;檢測(cè)器為示差檢測(cè)器ＲID.

1.3分子量測(cè)定
分別稱取10mgAFG和肝素鈉，采用SEC-ＲI-MALLS聯(lián)用技術(shù)測(cè)定AFG的分子量及分子量分布，委托北京理化測(cè)試中心完成.依次稱取系列分子量右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)品，配制成濃度為10mg/mL的0.1mol/LNaCl溶液，0.45μm天津津騰微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣量為20μL，數(shù)據(jù)采用GPC軟件處理，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，用標(biāo)定分子量的AFG進(jìn)行校正，既得寬標(biāo)校正曲線.可用于dAFG的分子量及其分布檢測(cè).PMP衍生化:供試品溶液中加入100μL0.6mol/L的氫氧化鈉溶液和200μL0.5mol/L的PMP甲醇溶液，渦旋混勻;70℃衍生化反應(yīng)60min;反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，加入200μL0.3mol/L的鹽酸溶液進(jìn)行中和，用1mL三氯甲烷萃取3次，水相部分經(jīng)0.22μm天津津騰微孔膜過(guò)濾供HPLC分析.另取單糖標(biāo)準(zhǔn)品(Glc、Gal、GlcN.HCl、GalN.HCl、IdoA)適量，加1mL水溶解，作為對(duì)照溶液，進(jìn)行PMP衍生化反應(yīng).

2.結(jié)語(yǔ)
從白玉蝸牛中分離純化了均一的酸性多糖AFG，得率為0.88%，其Mw為23.84kDa，通過(guò)理化分析及波譜檢測(cè)可以判斷，AFG是由等摩爾的氨基葡萄糖GlcNAc和2位硫酸酯基取代的艾杜糖醛酸(IdoA2S)通過(guò)α(1→4)糖苷鍵交替連接而成，與非洲大蝸牛來(lái)源GAG結(jié)構(gòu)基本一致.與哺乳動(dòng)物來(lái)源的肝素和硫酸乙酰肝素相比，AFG的結(jié)構(gòu)相對(duì)規(guī)則.糖苷鍵選擇性的β-消除解聚法解聚顯示，除糖苷鍵裂解外，其他基本結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，其確切結(jié)構(gòu)可進(jìn)一步通過(guò)純化寡糖確證，即利用bottom-up策略研究AFG的確切結(jié)構(gòu).